Agilent julkaisi uutiskirjeen lamp-määritysmenetelmistä

Agilent Technologies on julkaissut uuden TekTalk-uutiskirjeen, joka keskittyy silmukan välittämään isotermaalisesti vahvistavaan (LAMP) DNA:n monistustekniikkaan. Tämä menetelmä tarjoaa etuja perinteisiin polymeraasiketjureaktioihin (PCR) verrattuna, erityisesti sen yksinkertaisuuden, vankkuuden ja edullisuuden ansiosta.

LAMP-tekniikka hyödyntää automaattista syklitystä ja säikeen siirtymistä DNA-näytteiden monistamisessa. Se ei vaadi kalliita lämpösyklaattoreita, mikä tekee siitä kustannustehokkaan vaihtoehdon. Tekniikkaa käytetään jo diagnostiikassa, kuten tartuntatautien tunnistuksessa, sekä elintarvikkeiden laadunvalvonnassa ja ympäristön seurannassa.

Uutiskirjeessä esitellään kaksi uutta sovellusmuistiota, jotka käsittelevät Agilent BioTek Synergy Neo2 -hybridilukijan käyttöä LAMP-määritysten kineettisessä seurannassa. Muistiot korostavat myös instrumentin parannettua lämpötila-alueen käyttöä analyysien suorituskyvyn parantamiseksi. Lisäksi julkaisu tarjoaa käytännön neuvoja LAMP-määritysten optimointiin, mukaan lukien alukesuunnittelu ja valinta.

Tekniikan ytimessä ovat 2-3 alukeparia, jotka tunnistavat kohde-DNA:n spesifisiä alueita. Monistusreaktion aikana vapautuvat vetyionit muuttavat reaktioseoksen pH:ta, mikä voidaan havaita esimerkiksi fenolipunavärin muutoksella magentasta keltaiseen. Tämä värimuutos mahdollistaa positiivisten ja negatiivisten näytteiden erottamisen.

Manuaalisen tarkkailun lisäksi Agilent esittelee mikrolevyperustaisia, korkean läpimenon automaattisia menetelmiä LAMP-määritysten tulosten tarkasteluun. Tämä sisältää 420 nm ja 560 nm absorbanssisuhteen (420:560) kineettisen seurannan, joka lisää luotettavuutta ja mahdollistaa suuren näytemäärän käsittelyn.