Agilent présente une nouvelle méthode de purification d'oligonucléotides par HPLC/MS

Agilent Technologies a développé une nouvelle méthode de purification des oligonucléotides synthétiques (ON) par chromatographie liquide haute performance préparative couplée à la spectrométrie de masse (HPLC/MS).

La méthode vise à accélérer et à améliorer le processus de purification des oligonucléotides, qui sont essentiels dans la recherche en sciences de la vie et en diagnostic. Les techniques antérieures, telles que la HPLC en phase inverse à paire d'ions (IP-RP HPLC), ont été efficaces, mais leur mise à l'échelle pour la production nécessitait de grands volumes de réactifs coûteux comme l'hexafluoroisopropanol (HFIP), limitant leur rentabilité.

La nouvelle approche d'Agilent utilise le dibulylamin (DBA) comme agent de formation de paire d'ions et le tris(hydroxyméthyl)aminométhane (TRIS) comme tampon. Le DBA a démontré une résolution plus élevée avec les ON à chaîne courte, et le TRIS remplace le HFIP coûteux. Cela permet une purification de lots plus importants à moindre coût.

Le processus utilise le système Agilent 1290 Infinity II Autoscale Preparative LC/MSD. La purification est réalisée à l'aide d'un logiciel automatisé qui optimise les gradients et collecte les fractions en fonction des données de spectrométrie de masse. La réanalyse des fractions collectées confirme que les oligonucléotides purifiés atteignent généralement un niveau de pureté supérieur à 99 %.

L'entreprise a présenté ces résultats dans une affiche détaillant la capacité de la méthode à produire rapidement et sélectivement des oligonucléotides de haute qualité, facilitant ainsi leur application plus large dans la recherche et le diagnostic.