Agilent Technologies présente des méthodes d'amplification d'ADN LAMP

Agilent Technologies a publié un nouveau bulletin TekTalk axé sur la réaction d'amplification isotherme par boucle (LAMP), une technique d'amplification de l'ADN. Cette méthode offre des avantages significatifs par rapport à la réaction en chaîne par polymérase (PCR) traditionnelle grâce à sa simplicité, sa robustesse et son faible coût.

La technique LAMP utilise l'autocyclage et le déplacement de brins pour amplifier les échantillons d'ADN. Sa nature isotherme élimine le besoin de thermocycleurs coûteux, ce qui en fait une alternative économique. La méthode est déjà utilisée en diagnostic, comme l'identification des maladies infectieuses, ainsi que dans le contrôle qualité alimentaire et la surveillance environnementale.

La newsletter présente deux nouvelles notes d'application décrivant l'utilisation du lecteur multimode hybride Agilent BioTek Synergy Neo2 pour le suivi cinétique des tests LAMP. Ces notes soulignent également la plage de température étendue de l'instrument pour améliorer les performances des essais. De plus, des conseils pratiques sont fournis pour l'optimisation des essais LAMP, y compris la sélection et la conception des amorces.

Au cœur de la technique se trouvent 2 à 3 paires d'amorces qui reconnaissent des régions spécifiques de l'ADN cible. Pendant la réaction d'amplification, des ions hydrogène sont libérés, modifiant le pH du mélange réactionnel. Ce changement de pH peut être détecté par un changement colorimétrique, tel que le passage du rouge de phénol de magenta à jaune, permettant de différencier les échantillons positifs et négatifs.

Au-delà de l'observation manuelle, Agilent présente des méthodes automatisées à haut débit sur microplaques pour l'évaluation des essais LAMP. Cela comprend la mesure cinétique du rapport d'absorbance à 420 nm et 560 nm (420:560), ce qui améliore la fiabilité et permet le traitement de grands volumes d'échantillons.