Agilent presenterar ny metod för rening av oligonukleotider med HPLC/MS

Agilent Technologies har utvecklat en ny metod för att rena syntetiska oligonukleotider (ON) med hjälp av preparativ vätskekromatografi med hög separationseffekt och masspektrometri (HPLC/MS).

Metoden syftar till att snabba upp och förbättra reningsprocessen för oligonukleotider, vilka är centrala inom forskning inom livsvetenskap och diagnostik. Tidigare metoder som jondipparfase omvänd fas (IP-RP HPLC) har varit effektiva, men vid uppskalning till produktion har de krävt stora mängder dyra reagenser, som hexafluoroisopropanol (HFIP).

Agilents nya metod använder dibuylamin (DBA) som jondipare och tris(hydroxymetyl)aminometan (TRIS) som buffert. DBA har visat sig ge högre separationseffekt med korta oligonukleotider, och TRIS ersätter den kostsamma HFIP. Detta möjliggör rening av större batcher till en lägre kostnad.

Metoden använder Agilent 1290 Infinity II Autoscale Preparative LC/MSD-systemet. Rening av oligonukleotiderna uppnås med hjälp av automatiserad programvara som optimerar gradienter och samlar fraktioner baserat på masspektrometri. Om-analyser bekräftar att de renade oligonukleotiderna uppnår en renhet på typiskt över 99 %.

Företaget presenterade resultaten i en poster som beskriver metodens förmåga att snabbt och selektivt producera högkvalitativa oligonukleotider, vilket underlättar deras bredare användning inom forskning och diagnostik.