Agilent presenterar nyhetsbrev om LAMP-analyser

Agilent Technologies har lanserat ett nytt nummer av sitt nyhetsbrev TekTalk, med fokus på Loop-mediated isothermal amplification (LAMP), en teknik för DNA-amplifiering. Denna metod erbjuder betydande fördelar jämfört med traditionella PCR-metoder tack vare sin enkelhet, robusthet och låga kostnad.

LAMP-tekniken använder autocyklering och strängdisplacement för att amplifiera DNA-prover. Den isolerade värmekällan eliminerar behovet av dyra termocyklers, vilket gör den ekonomiskt fördelaktig. Tekniken används redan inom diagnostik, såsom identifiering av infektionssjukdomar, samt för kontroll av livsmedelskvalitet och miljöövervakning.

Nyhetsbrevet presenterar två nya applikationsnoter som beskriver användningen av Agilent BioTek Synergy Neo2 hybrid multimode-läsaren för kinetisk övervakning av LAMP-analyser. Noterna belyser även metodens förmåga att förbättra analysprestanda genom ett utökat temperaturområde för instrumentet. Dessutom erbjuds praktiska tips för optimering av LAMP-analyser, inklusive urval och design av primers.

Kärnan i tekniken är användningen av 2-3 primarpar som identifierar specifika regioner i mål-DNA. Under amplifieringen frigörs vätejoner som ändrar reaktionsmediets pH. Denna pH-förändring kan detekteras genom en färgförändring, till exempel av fenolrött från magenta till gult, vilket möjliggör differentiering mellan positiva och negativa prover.

Utöver manuell observation presenterar Agilent automatiserade metoder för hög genomströmning på mikrotiterplattor för utvärdering av LAMP-analyser. Detta inkluderar kinetisk mätning av absorbansförhållandet vid 420 nm och 560 nm (420:560), vilket ökar tillförlitligheten och möjliggör hantering av stora provvolymer.